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更新時(shí)間:2018-11-02
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系說明書訂購流程:
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產(chǎn)品名稱 | HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系說明書 |
英文名稱 | HBE, normal human bronchial epithelial cell line |
規(guī)格 | 5×105cells/瓶 |
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系說明書功能:
(1) 血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2) 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3) 與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1) 主動(dòng)脈硬化。
(2) 主動(dòng)脈瘤
(3) 主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2) 鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4) 每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5) 肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系說明書運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
0.156-10 ng/mL人CD138分子(CD138)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Syndecan-1
15.6-1000 pg/mL人音猬因子(Shh)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Sonic hedgehog protein
0.156-10 ng/mL人硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Selenoprotein P
78-5000 pg/mL人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Protein S100-A9
HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系說明書ME-180(人子宮頸表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
抗生素Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/抗生素2號(hào)培養(yǎng)基(PH6.5-6.6)/Antibiotic Agar NO.2四環(huán)素、土霉素等的效價(jià)測(cè)定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞gersion
小鼠膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱:MouseS
大豆分離蛋白/豆蛋白質(zhì)/大豆蛋白/分離蛋/Soy protein isolateBR,90%250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SF17(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
22RV1(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NZM瓊脂/NZM AgarBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞
HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Andersons Rhododendron Medium with VitaminsBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠膀胱上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
文名稱 | 規(guī)格 | |
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞說明書 | HK-2 in HK-2 cells | 5×105cells/瓶 |
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
78-5000 pg/mL人NAD依賴性脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mLELISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-1
0.312-20 ng/mL.人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2(Serine/threonine-protein kinase SIK2)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL.ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase SIK2
0.312-20 ng/mL.人山梨糖和SH3結(jié)構(gòu)域包含蛋白1(SORBS1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL.ELISA Kit for Human Sorbin and SH3 domain-containing protein 1
0.312-20 ng/mL人睪丸蛋白聚糖2(Testican-2)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Testican-2
HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞說明書Lncap clone FGC(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
3% NaC1糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分)英文名稱:PC-12(未分)
BC-009(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
A-431(人表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
金黃地鼠膚成纖維細(xì)胞英文名稱:GHS1
KATO III(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:500次
人肌肉組織來源細(xì)胞英文名稱:HMF
玉米粉瓊脂/Corn Meat Medium真菌檢測(cè);霉菌產(chǎn)毒培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
293T, SV40轉(zhuǎn)的人胚腎上細(xì)胞系
NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
真菌培養(yǎng)基/霉菌培養(yǎng)基/Mould Medium用于無菌試驗(yàn)及真菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
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